病毒性傳染病對人們的生命健康造成嚴重威脅。作為病毒診斷和鑒定的先決條件，需要篩選出適宜病毒復制的宿主細胞系，傳統(tǒng)的基于孔板的方法培養(yǎng)周期長、樣本和試劑消耗大、操作繁瑣，不利于實現(xiàn)快速的病毒培養(yǎng)和鑒定。

　　想要更好的解決這一問題，對于微流控技術(shù)的應(yīng)用是必要的，為此中科院武漢病毒所李峰研究員、浙江大學賀永教授和中科院深圳合成所張先恩研究員團隊合作設(shè)計了一種高效的微流控細胞芯片，通過快速篩選允許細胞實現(xiàn)病毒的分離和培養(yǎng)。Aigtek安泰電子今天就給大家分享他們的優(yōu)秀研究成果。

　　如圖1，研究者設(shè)計了由聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）上蓋、聚乳酸（PLA）框架、聚二甲基硅氧烷（PDMS）芯片和聚甲基丙烯酸甲酯下蓋自上而下組裝而成的微流控芯片，在PDMS芯片內(nèi)置有細胞培養(yǎng)腔室。實驗結(jié)果表明，微流控細胞芯片可以支持5種不同細胞系的共培養(yǎng)，維持良好的細胞活力，在極低MOI（感染復數(shù)）條件下實現(xiàn)了流感病毒H1N1和腸病毒EV71允許細胞系的模擬篩選。

　　圖1微流控細胞芯片的設(shè)計和工作原理示意圖

　　如圖2，研究者通過使用3D打印技術(shù)制備了微流控芯片模具；通過拋光模具、澆筑并固化PDMS在短時間內(nèi)定制了的芯片內(nèi)的微流道結(jié)構(gòu)。實驗證明微流控芯片內(nèi)的細胞培養(yǎng)腔表面易于預處理和實現(xiàn)不同細胞系在單個芯片上的接種，可以允許將各種PDMS芯片與不同的細胞整合來重建微流控芯片。

　　圖2微流控芯片的制造原理示意圖

　　如圖3，研究者選擇A549、Vero、RD、MDCK和BHK-21細胞作為候選病毒允許細胞系用于構(gòu)建微流控芯片。為了在微流控芯片內(nèi)共培養(yǎng)這些不同的細胞系，使用含1%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基以使細胞逐漸適應(yīng)。實驗結(jié)果表明，5種細胞系在接種后均能在芯片進行貼壁生長并表現(xiàn)出正常的形態(tài)和活力。

　　圖3在微流控芯片上共培養(yǎng)多種不同細胞系

　　如圖4，EV71病毒允許細胞篩選結(jié)果表明，在MOI為0.389感染30h后，RD細胞表現(xiàn)出典型的細胞病變效應(yīng)（CPE）。當用熒光定量PCR（RT-qPCR）檢測不同細胞系中EV71病毒RNA拷貝數(shù)時，RD細胞內(nèi)EV71的RNA拷貝數(shù)顯著高于其他細胞系，尤其是在極低MOI條件下。

　　圖4微流控芯片篩選EV71允許細胞的可行性

　　如圖5，H1N1病毒允許細胞篩選結(jié)果表明，在MOI為0.012時，孔板和芯片內(nèi)的MDCK細胞均觀察到典型的CPE。然而，在MOI為0.00012的情況下，僅在微流控芯片內(nèi)的MDCK細胞中檢測到低水平的病毒復制。

　　圖5微流控芯片篩選H1N1允許細胞的可行性

　　利用微流控細胞芯片重現(xiàn)了病毒感染引起的CPE，表明基于該微流控細胞芯片的病毒培養(yǎng)方法可以替代傳統(tǒng)的孔板培養(yǎng)方法，并允許篩選多個潛在的宿主細胞系。該通量化細胞培養(yǎng)芯片可用于病毒的高效分離培養(yǎng)和抗病毒藥物篩選。

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　　一般微流控研究中會用到較高電壓，這時候就需要一款能夠穩(wěn)定輸出高電壓的高壓放大器來進行驅(qū)動，ATA-7000系列功率放大器，最大輸出電壓可達10kVp-p（±5kVp），帶寬（-3dB）DC~5kHz，電流20mAp，功率100Wp，可以幫助研究人員更好地完成實驗。

　　PS：論文原文Amicrofluidiccellchipforvirusisolationviarapidscreeningforpermissivecells，發(fā)表在VirologicaSinica上

　　以上就是本次關(guān)于微流控細胞芯片的快速篩選實現(xiàn)病毒分離及培養(yǎng)行業(yè)研究以及功率放大器的全部內(nèi)容介紹，希望能幫助大家對功率放大器有更深入的了解，想要了解更多電壓放大器的相關(guān)應(yīng)用案例的工程師歡迎繼續(xù)關(guān)注我們。

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